操作室厌氧环境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室内放入两个无毒塑料袋。
2)混合气瓶、氮气瓶输入压力调整,调节减压阀,使输入压力为0.1Mpa
3) 打开设备后配,电源开关后,按控制牌上的总电源键,使设备通电。
4)操作室放入1000g钯粒(密封),由冷凝系统除湿,并放入厌氧指示剂。
5)关紧取样室内外门,并抽真空校验。(按控制面牌上真空泵键,按一下开,再按一下关)
6)操作室内初次置换(氮气置换):
(1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一个插入塑料袋。
(2)接通氮气进气路,打开操作室氮气控制阀,使两只塑料袋充足氮气后,关闭电磁阀,然后扎紧袋口。
(3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。
(4)把塑料袋内氮气渐渐的放于操作室内,至全部防除。
7)操作室第二次置换(氮气置换)重复一次冲氮过程,取样室先抽真空,并注意随时按排气阀关闭排气。
8)操作室第三次置换(混合气体置换) (混合气体配比为H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)调换气路打开操作室混合气阀进气,冲气时取样室先抽真空,并注意随时按排气阀关闭排气。
(2)混合气充满塑料袋后,关闭电磁阀,并打开混合气限流阀,使混合气经过稳流器、流量计、调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。
(3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。
(4)通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极为量状态
9)操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,并在厌氧指示条反应区上滴一点洁净水,1-2小时后,观察其变色情况,反应部分深蓝色变为浅蓝为操作室内达到厌氧环境。
10)紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理,灭菌时间自定。
菌种的置入和培养
1)检查取样室内门并关紧之。
2)打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外们。
3)取样室充氮置换三次过程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打开取样室氧气阀进气,使指针回复零位,关掉阀。取样室充氮置换三次过程结束。
4)如选定真空度较低就需要增加置换的次数。
5)取样室外门开启、关紧后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)检验。
6)厌氧培养箱需要长期连续使用的条件
(1)每天在操作室内放入美兰指示条观察,如不能正常就重新换气。
(2)要长期连续输入微量的混合气体。使补进的氮气能和微量的氮结合通过催化吸收,保证了室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。
(3).连续培养运行一天,更换一次除氧剂和干燥剂。(换下的除氧剂和干燥剂可放在200℃干燥箱内,干燥2-3小时可使其复原)
7)接种棒灭菌器的应用:
(1)随时用镍烙电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒)。
(2)熔蜡处可直接放上试管封蜡口旋转熔蜡。
8)操作室理的培养箱理的培养箱内的温度可任意选择和控制。
注意事项
1.仪表尽可能地安装于空气清静,温度变化较小的地方。
2.开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的说明书、掌握正确的使用方法。
3.培养物放入是在操作室内达到厌氧环境后放入。
4.如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持12小时厌氧状态。(超过12小时则根据需要把培养物取出另作处理)。
5.经常注意气路有无漏气现象。
6.调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体
7.真空泵按要求使用,定期检查加油。
8.停止使用,关闭总电源键,及设备后部的电源开关
厌氧培养箱能在无氧环境下进行细菌培养和操作,是厌氧微生物研究的关键工具-
。为了帮你快速掌握,下面这个表格汇总了主要操作步骤和关键点:
主要步骤核心操作关键参数/目标准备工作放置钯粒、干燥剂、美兰指示剂;检查气路和密封-钯粒约1000g,干燥剂约500g-
操作室置换 (创造无氧环境)多次气体置换:先抽真空,再充入氮气,重复2-3次;最后用混合气体置换1次-
混合气体比例通常为 N₂ 85% / H₂ 10% / CO₂ 5% -,操作室压力建议 0.06-0.08MPa -
取样室置换 (放入/取出样品)三次置换:抽真空后充氮气,重复两次;第三次抽真空后充入混合气体-每次抽真空度建议 66kPa (约500mm汞柱) 以上 -
长期运行维护持续补充微量混合气体;定期更换并烘干脱氧剂和干燥剂;每日检查厌氧指示剂-
补充气体流量约 10ml/分钟 -;脱氧剂和干燥剂通常 每24小时 更换并烘干(如 200℃烘2-3小时)-
🔧 详细操作指南
⚠️ 重要注意事项